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Cre工具鼠列表(精選)
新聞來源:CEIDI西遞 發布時間:2024-06-11

作為一只Cre工具鼠,我是基因工程的產物,專為科學研究而生。我體內攜帶的Cre重組酶基因,能與另一個伙伴的LoxP位點相互作用,構成Cre-LoxP系統的基礎。在實驗小鼠族群中,我的核心從業優勢在于可以為時空特異性的基因操控需求賦能。


在科研應用上,我總是大顯身手:

神經系統探索:當Cre表達被限定在特定神經元亞群時,我幫助研究人員揭示特定腦區或神經回路的功能,以及與神經退行性疾病相關的基因作用機制。

腫瘤學研究:通過協助條件性激活或失活致癌基因,我在模擬人類腫瘤發展、研究腫瘤生物學及測試治療策略方面發揮著關鍵作用。

代謝研究:如果需要在特定代謝器官中調控基因,也少不了我的身影,我給肥胖、糖尿病等代謝性疾病的研究提供了重要的體內模型。

現在,我正和我的兄弟姐妹們住在一個個小房子里,什么?你問我們各有什么神通本領?不如直接來看看我們的登記名錄:

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Cre工具鼠

一只工具鼠的自白


Cre工具鼠&熒光標記模型

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誘導型Cre工具鼠

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Dre工具鼠

Cre工具鼠列表(精選)(圖5)


其他

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模型驗證——以Cyp19a1-IRES-Cre小鼠為例

將Cyp19a1-IRES-Cre小鼠與Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配,產生雙基因雜合子代小鼠,Cre酶介導的重組將導致tdTomato蛋白在子代Cre陽性細胞中表達。分別采集6周齡子代小鼠的卵巢、睪丸和腦組織,通過免疫熒光染色觀察Cre重組酶的表達情況。其基因型為——實驗組(Cre+):Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+];對照組(Cre-):Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]。

Cre重組酶在雌性生殖腺中的表達情況

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圖1 雌性小鼠卵巢免疫熒光染色[1]


Cre+(Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])雌性小鼠在卵巢顆粒細胞中存在大量的tdTomato蛋白紅色熒光,表明在該部位存在大量的Cre重組酶表達,而對照組(Cre-)小鼠中檢測不到tdTomato紅色熒光的表達,不存在Cre重組酶的表達。

Cre重組酶在雄性生殖腺中的表達情況

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圖2 雄性小鼠睪丸免疫熒光染色[1]


Cre+(Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])雄性小鼠在少量睪丸細胞中存在紅色熒光,其定位與DAPI部分重合,表明這些細胞可能為睪丸支持細胞或其他類型細胞;而對照組(Cre-)小鼠中檢測不到tdTomato紅色熒光的表達,不存在Cre重組酶的表達。

Cre重組酶在腦海馬區的表達情況

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圖3 腦部海馬區免疫熒光染色[1]


Cre+(Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])小鼠在海馬CA區域結構(圖中白色框內位置)中存在部分的紅色熒光,顯示在此類區域中Cre發生重組;而對照組(Cre-)小鼠中檢測不到tdTomato紅色熒光的表達,不存在Cre重組酶的表達。(海馬CA區:Hippocamp formation-CA,包括CA1和CA2)

Cre重組酶在腦室、纖維束和腦核區域的表達情況

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圖4 腦室、纖維束和腦核免疫熒光染色[1]


Cre+(Cyp19a1-IRES-Cre[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])小鼠在側腦室、終紋、尾殼核結構中存在部分的紅色熒光,顯示在此類區域中Cre發生重組;而對照組(Cre-)小鼠中檢測不到tdTomato紅色熒光的表達,不存在Cre重組酶的表達。(纖維束區域:終紋-Stria terminalis,圖中左側箭頭所示部位;腦室區域:腦側腦室-Lateral ventricle,圖中中間箭頭所示部位;腦核區域:尾殼核-Caudoputamen,圖中右側箭頭所示部位)


總結

Cyp19a1-IRES-Cre小鼠模型中Cre重組酶的表達主要定位于卵巢顆粒細胞中,同時也可以在腦部的海馬區、腦室、纖維束和腦核中的部分細胞中發生由Cre重組酶介導的重組,Cre重組酶的表達與小鼠內源性Cyp19a1基因的表達模式相似,具有良好的特異性。

來源:賽業生物


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